Date of Award

4-2020

Document Type

Dissertation

Degree Name

Doctor of Philosophy (PhD)

Department

Biology

First Advisor

Synan AbuQamar

Second Advisor

Khaled EL-Tarabily

Third Advisor

Mutamed Ayyash

Abstract

Biotic and abiotic stress factors consistently threat during different stages of the plant’s life cycle. A complex network of signaling molecules is required to overcome stresses, which is linked to general physiological and molecular processes. Botrytis cinerea is a necrotrophic fungal pathogen that causes grey mold disease on many crops. Apart from B. cinerea, several biotic, abiotic and hormonal stresses have detrimental effects on plant growth and productivity. The aim of this study is to identify the genetic regulations of individual stress types using comparative microarray analyses, and to find out the role of differentially expressed genes in Arabidopsis-B. Cinerea pathosystem and the common genetic regulations across these stresses in response to B. cinerea. The transcriptomic data were analyzed to identify the overlapping stress-regulated genes in response to B. cinerea and other biotic (Alternaria brassicicola, Pseudomonas syringae PV tomato DC3000 and DC3000 avrRpm1, and Peris rapae), abiotic (oxidative stress and wounding) and hormonal (salicylic acid, methyl jasmonate, ethylene and abscisic acid) stresses. Among the 1554 B. cinerea up-regulated genes, 24%, 1.4% and 14% were commonly induced by biotic, abiotic and hormonal treatments respectively. Similarly, about 18%, 2.5% and 22% of B. cinerea down-regulated genes were commonly repressed by these stress groups. WRKY33 transcription factor was previously reported for its resistance to B. cinerea. In this study, Arabidopsis WRKY33 over-expression and mutant lines were compared for their response to B. cinerea infection. The wrky33 mutant plants showed altered susceptibility, whereas the 35S:WRKY33 overexpression plants showed resistance to B. cinerea. The expression profile of 12-oxo-phytodienoic acid and phytoprostane A1-treated Arabidopsis plants in response to B. cinerea showed that cyclopentenones can also modulate WRKY33 regulation upon inoculation with B. cinerea. These results support the role of electrophilic oxylipins in mediating plant responses to B. cinerea infection through the TGA transcription factor. Results obtained from the metatranscriptomic and in silico gene analyses revealed the involvement of RAP2.4 (related to AP2.4) in plant immunity. Arabidopsis rap 2.4 T-DNA insertion mutant lines exhibited increased resistance to B. cinerea. This is the first report to uncover the role of RAP2.4 in plant defense against B. cinerea. This will pave the way to producing crops with less use of chemical pesticides and will provide a basis for breeding programs to increase tolerance and improve yield performance in crops.

Comments

تشكل عوامل الإجھاد الحیویة واللاحیویة تھدیدات ثابتة خلال المراحل المختلفة من دورة حیاة النبا ت. ولكي یتجاوز النبات ھذه الضغوطات یحتاج إلى شبكة معقدة من الإشارات الحیویة المرتبطة بالعملیات الفسیولوجیة والجزیئیة. بوترایتس سینیریا "Botrytis cinerea" ھي نوع من الفطریات الضارة التي تعتبر ثاني أھم المسببات للأمراض النباتیة والذي یسببً مرض العفن الرمادي في العدید من المحاصیل الزراعیة. بغض النظر عن البوترایتس سینیریا، فإن العدید من الضغوط الحیویة واللاحیویة والھرمونیة لھا آثار ضارة على نمو وإنتاجی ة النبا ت. تھدف ھذه الدراسة إلى تحدید المكونات الوراثیة الشائعة أثناء الاستجابة للإجھاد ومعرفة دور الجینات المعبرة عنھا، وبالأخص الجینات الممرضة في الناجمة عن تأثیر فطر البوترایتس سینیریا. تم تحلیل بیانات التعبیر أو النسخ الجیني للتعرف والمقارنة بین الجینات المعبرة وكیفیة استجابتھا للضغوط الحیویة واللاحیویة والھرمونیة. ومع ارتفاع التعبیر الجین ﻠ۱٤٤٥ جین، وجد أ ن ٢٤ ٪ و ٤٠١ ٪ و ١٤ ٪ تم ارتفاع التعبیر الجیني بسبب الضغوط الحیویة واللاحیو یة والھرمونی ة، على التوالي. وبالمثل، تقریبا ١٨٪ و ٢. ٥ ٪ و ٢٢ ٪ من الجینات التي قل تعبیرھا بشكل عام استجابة لھذه الضغوط. WRKY 33 تم دراسة مقاومتھ لنبات البوترایتس سینیریا على أحدى عوامل النسخ WRKY 33 ونبات الأرابیدوبسیس الحامل للطفرة الجینیة WRKY 33 وكیفیة استجابتھما لفطر البوترایتس سینیریا. أظھر النبات الحامل للتعبیر الجیني WRKY 33 ستجابة تحسسیة، في حین أظھر النبات الحامل للتغیر الجیني WRKY 33: 35S مقاومة لنفس الفطر. كما وأظھر التعبیر الجیني أن نبات الأرابیدوبسیس المصاب بالبوترایتس سینیریا والمعالج12 - oxo-phytodienoic acidو phytoprostane A1 أن cyclopentenones یستطیع التحكم ب WRKY 33 بتدعم ھذه النتائج دور أوكسیلیبینا ت الإلكتروفیلي "electrophilic oxylipins" في تحفیز استجابات النبات ضد الإصابة ب لفطر البوترایتس سینیریا عن طریق عامل النسخ الجیني .TGA ھذا وكشف ت النتائج التي تم الحصول علیھا عن طریق تحلیل الجینا ت بالمیتاترانسكری بتومیك أن جین ال2.4 RAP لھ دور كبیر في مناعة النبات. لقد أظھر نبا تا لأرابیدوبسیس الحامل للطفرة rap2.4 T-DNA تزای دا في مقاوم ة فطر ا لبوترایتس سینیریا مع انخفا ض أعرا ض المر ض و نقص نمو العوامل السمیة في النبا ت. تكشف ھ ذه الدراسة ولأول مرة عن دورRAP2.4 في مناعة النبات ض د فطر البوترایتس سینیری ا . ستمھ د ھذه الدراسة الطریق لإنتاج محاصیل زراعیة مع استخدام أقل للمبیدا ت الكیمیائیة والذي بدوره سیوفرزیادة في تحسین الانتاج عن طریق البرامج الزراعیة الھجینة المستقبلیة.

Download

Share

COinS