Date of Award

3-2017

Document Type

Thesis

Degree Name

Master of Science (MS)

Department

Biology

First Advisor

Dr. Asma Al Menhali

Second Advisor

Sherif Karam

Abstract

To maintain cellular homeostasis, the epithelial lining of the stomach wall continuously fluctuates between cellular proliferation, differentiation, and apoptosis. A key player in this process is the gastric stem cell (GSC). GSCs are located in the isthmus region of the corpus gastric gland and have the potential to proliferate and differentiate. Although several pathways have been identified to regulate stem cell role in several body tissues, little is known about controlling GSC homeostasis. This project aims to study the role of estrogen (E2) in GSC homeostasis using the well-established mouse gastric epithelial progenitor (mGEP) cell line. Our data showed that both estrogen receptor (ER) subunits alpha and beta are expressed in the mGEP cells at mRNA and protein levels. Incubation of mGEP cells with the commonly used selective estrogen receptor modulator (SERM) -tamoxifen- (4-OHT) decreased the cellular viability in a time and concentration-dependent manner. Cell viability was not significantly changed in the E2 treated cells. By using semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), ER target genes such as insulin-like growth factor 1 receptor (Igf1r), cyclin D1 (Ccnd1), low-density lipoprotein receptor (Ldlr), interleukin-6 (Il-6) and vascular endothelial growth factor A (Vegfa) generally showed a concentration-dependent decrease of expression when treated with 4-OHT confirming that 4-OHT works as an antagonist to ERα. This well-controlled in vitro system helps to understand the impact of E2 signalling on GSC homeostasis. Especially since the effect of 4-OHT on the stomach of breast cancer patients is not fully studied.

Comments

للحفاظ على التوازن الخلوي، بطانة جدار المعدة يتقلب بشكل مستمر بين انقسام وتمايز الخلايا، وموت الخلايا المبرمج. اللاعب الرئيسي في هذه العملية هي الخلية الجذعية المعدية (GSC). تقع الخلايا الجذعية المعدية (GSCs) في منطقة البرزخ في الغدد المعدية الموجودة في جسم المعدة ولها القدرة على التكاثر والتمايز. على الرغم من أن تم التعرف على عدة مسارات لتنظيم دور الخلايا الجذعية في العديد من أنسجة الجسم، القليل فقط يعرف عن السيطرة على توازن الخلايا الجذعية في المعدة. يهدف هذا المشروع إلى دراسة دور هرمون الإستروجين (E2) في توازن الخلايا الجذعية المعدية باستخدام أحد أنواع الخلايا الجذعية المعدية من معدة الفئران mouse gastric epithelial progenitor- mGEP) ( نتاتجنا تشير أن كل من مستقبلات هرمون الإستروجين ( ERs) ألفا وبيتا موجودة في خلايا mGEP في مستويات الحمض النووي الريبوزي المرسل (mRNA) والبروتين. معالجة خلايا mGEP مع مغير هرمون الإستروجين الانتقائي ( SERM) المسمى بالتاموكسفين (Tamoxifen or 4-OHT) أدى إلى انخفاض في بقاء الخلايا بطريقة تعتمد على وقت المعالجة وتركيز الدواء. في الجانب الآخر، لم يلاحظ أي تغيير بشكل كبير في بقاء الخلايا المعالجة بالإستروجين (E2). كذلك، بالإستخدام النوعي لعكس النسخ تفاعل البلمرة المتسلسل ( RT-PCR)، اشارات الجينات المستهدفة لمستقبلات الإستروجين (ERs) مثل مستقبل عامل النمو الذي يشبه الأنسولين 1 (Igfir)، السيكلي Ccnd1) D1)، ومستقبل البروتين الدهني منخفض الكثافة ( Ldlr)، أنترلوكين 6 (6-Il) و عامل نمو بطانة الأوعية الدموية ألف (Vegfa) عموما انخفاضاً يعتمد ويرتبط بارتفاع تركيز التاموكسفين (OHT-4) مؤكدا أن التاموكسفين (OHT-4) يعمل بطريقة مضادة لمستقبل الإستروجين ألفا (ER). تساعد هذه الدراسة على فهم تأثير هرمون الإستروجين (E2) على توازن الخلايا الجذعية المعدية (GSCs) خاصة أن تأثير التاموكسفين (OHT-4) على معدة کامل.

COinS